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DNA测序

测序业务范围:
接收菌株、质粒、PCR产物等样品的DNA测序业务。
测序仪器说明:
采用新型ABI 3730XL测序仪,保证高质量的测序反应,每个反应准确读取碱基数在700-800之间。

ABI 3730XL DNA分析系统简介
ABI 3730XL是代表高通量测序的新一轮测序平台,该仪器用于DNA测序的方面的主要优势如下:
(1) 测序长度保证:该仪器采用的新型液体分离胶可使读序长度达1100bp,精确读序可达800bp。
(2) 测序准确性:该仪器配备了新型的碱基识别与质量评分软件,大大提高了测序的准确性。
(3) 克服片段的二级结构及重复碱基的影响:该仪器的电泳温度可达70度,能够有效解决因DNA片段二级结构带来的困难,对于poly A、poly T、poly G等有更好的测序效果。
(4) 该仪器对测序模板DNA浓度范围要求宽泛。
(5) 双光束双侧激光激发机制保证信号读取的高度均一性。
(6) 毛细管内荧光检测,DNA序列灵敏度高。
(7) 良好的温控装置保证片段分析准确性及重现性良好。

工作时间:
收到客户样品后的3-4个工作日内出结果,通过E-mail发送实验报告。
收费及付款方式:
费用为45元/反应,如样品数量较大,价格另议。
付款方式为预付款。
测序样品说明:
测序接收的样品主要有四类:新鲜或甘油菌液、质粒、纯化后的PCR片段和PCR原液。

菌液
1.新鲜无污染菌液1 ml以上,保存时间较长的甘油菌,请重新摇菌后送样。
2.可提供Amp,Kan,Chl三种抗生素,其余抗生素请客户自己提供。
3.可提供LB培养基,如果非LB培养基的菌液请培养后送样。
质粒
1.已纯化质粒大于20 μl,溶于超纯水浓度大于100 ng/μl,大质粒必须注明载体长度。
2.质粒拷贝数低的样品,请提供质粒。
PCR产物
1.样品电泳检测为单一明亮条带。不接受样品小于150 bp、电泳检测条带呈弥散多带的样
品;非单一条带样品,建议克隆后测序。
2.PCR未纯化样品体积大于50 μl,浓度大于50 ng/μl;已纯化PCR产物体积为20 μl,浓
度大于50 ng/μl,可取2 μl样品电泳检测条带清晰明亮,长片段需增加浓度。
3.已纯化的PCR产物请溶于超纯水中。

引物要求:
(1)浓度大于3umol/l,体积大于20ul。
(2)随机引物和兼并引物不适合测序。
(3)尽可能提供引物全序列,PCR退火温度。
(4)订单上注明的通用引物我公司可免费提供。
测序服务的注意事项:
(1)客户样品编号请用数字、英文字母(大写)或下划线填写,不超过5个字符。任何编号切忌用中
文、空格和“ " , . / ? < > ”等,避免系统出错。同时在样品管上清晰标明编号。
(2)T载体请注明全称:例如pBS-T、pGM-T、pGEM-T、pMD18T、pUC18或pUC19。
(3)M13+/-请注明是M13F,M13R,还是M13F(-47),M13R(-48)。
(4)一般测序样品浓度要求:100 ng/μl,详细要求请见下面测序样品要求。
(5)若临时变更订单,请及时电话告知(E-mail通知无效),若通知前已经安排反应,将照常收费。
(6)超过3K需要测通的样品,请客户自己提供引物、进行测序。
(7)简并引物和随机引物不宜用于测序。
(8)样品如需返还请填写备注栏,无特殊要求不返还。
(9)所送样品及引物,我们将免费保存1个月,超过一个月后如客户无特殊要求,样品将被销毁。
(10)由于自带引物问题或样品本身原因(复杂结构、高级结构等)造成测序失败照常收费,非样品原
因造成测序失败免费。
(11)选择E-mail发送报告的客户,如对结果有异议,请在收到报告3个工作日内电话告知,否则将视
为接受实验结果与服务费用。

 
 
 
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