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| RNA抽提服务 |
本公司提供:
动物，植物，细胞等total RNA的抽提服务。
对于一些难以提取RNA的组织，比如脂肪，骨骼，皮肤有一定的技术优势。
动植物总RNA提取-Trizol法
Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌，样品量从几十毫克至几克。
用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染。RNA可直接用于Northern斑点分析，斑点杂交，
Poly(A)+分离，体外翻译，RNase封阻分析和分子克隆。
1、从-80℃中取出中组织， 下100mg左右，马上浸泡在液氮中，直到不产生气泡，取出。立即放入预先加过1ml Trizol液的匀浆管中，置于冰中。（注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。）然后用分散器打匀，到乳状就可以了。每次使用分散器后，用无RNAse水空转，洗涤干净。
2、加入约1/5体积的氯仿，上下颠倒充分混匀，室温静置5 min。
3、4℃，12,000 rpm 离心15 min。
4、小心取出上清液，避免触及中间层，将上清夜转入新的1.5 ml离心管，加入等体积的异丙醇，轻轻颠倒混匀，室温静置5 min。
5、4℃，12000 rpm离心10 min。
6、吸去上清，保留沉淀，并向沉淀中加入0.7ml的70% 乙醇，4℃，12000 rpm离心15 min洗涤沉淀。
7、吸弃上清，沉淀室温自然晾干后加入适量RNase-free 的水，用Tip头吹吸，充分溶解沉淀。
[注意]
1、整个操作要带口罩及一次性手套，并尽可能在低温下操作。
2、加氯仿前的匀浆液可在-70℃保存一个月以上，
RNA沉淀在70%乙醇中可在4℃保存一周，-20℃保存一年。 |
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