SMART技术的出现是一个新的里程碑。这个称作Switching Mechanism At 5' end of the RNA Transcript(SMART),原理实际上非常简单:在合成cDNA的反应中逆转录酶以mRNA为模板合成cDNA,在到达mRNA的5'末端时会连续在合成的cDNA末端加上几个(dC).SMART引物的Oligo(dG)与合成cDNA末端突出的几个C配对结合形成SMART引物,这样所有cDNA但链的两端有已知的SMART引物序列,因此利用LDPCR扩增得到的cDNA就是全长cDNA。
Smart cDNA 的优点是:
1.可以得到全长的cDNA,这对于获得完整的基因序列有很大的帮助;
2.可以用特异的smart 引物扩增smart cDNA ,这样就可以得到大量的cDNA模板,而不需要做很大量的反转录。
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